病理科主任覃業(yè)軍談術(shù)中快速冰凍病理檢查
隨著我院臨床科室建設(shè)的不斷發(fā)展，住院及手術(shù)患者量逐年增長，病理科術(shù)中快速冰凍標(biāo)本量也呈逐年遞增趨勢。今天，山東第一醫(yī)科大學(xué)附屬省立醫(yī)院(山東省立醫(yī)院)病理科主任覃業(yè)軍為大家普及一下術(shù)中快速冰凍病理檢查的相關(guān)知識。
什么是術(shù)中快速冰凍病理診斷?
術(shù)中快速冰凍病理診斷是臨床醫(yī)師在手術(shù)過程中為決定進(jìn)一步的手術(shù)方案，請病理醫(yī)師對送檢的標(biāo)本進(jìn)行的緊急會診。它要求病理醫(yī)師在很短時(shí)間(30分鐘)內(nèi)，通過對送檢標(biāo)本的大體檢查、取材和冰凍切片快速制作并依據(jù)鏡下所見發(fā)出診斷報(bào)告。手術(shù)醫(yī)師根據(jù)診斷報(bào)告可獲得的內(nèi)容包括：病變性質(zhì)與類型(如腫瘤或非腫瘤、良性腫瘤或惡性腫瘤等)、惡性腫瘤的擴(kuò)散情況(如腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等)、明確腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留及切除組織的性質(zhì)等情況，從而為確定手術(shù)范圍提供依據(jù)。
術(shù)中快速冰凍病理診斷的流程
快速冰凍室值班人員接到手術(shù)室人員送來的標(biāo)本后先與之進(jìn)行核對并交接簽字，記錄收到的標(biāo)本時(shí)間并將患者信息錄入病理科冰凍信息系統(tǒng)，然后取材醫(yī)師對大體標(biāo)本進(jìn)行檢查、取材并對標(biāo)本性狀進(jìn)行客觀、詳盡的描述。所取材塊一般長寬2.0×2.0cm，厚度0.2-0.4cm，放在滴有膠水的標(biāo)本托上，然后一起置入冰凍切片機(jī)速凍臺上，約2-3分鐘后，待凝固的膠水將凍硬的組織固定在標(biāo)本托上便由技術(shù)人員進(jìn)行切片;將厚約4微米的組織片貼附在載玻片上便可依次進(jìn)行固定、染色(蘇木素和伊紅)、梯度酒精脫水、二甲苯透明、樹膠封片，這樣一張冰凍切片便制成了。制片過程約需10～15分鐘。切片交給診斷醫(yī)師后便可進(jìn)行鏡下觀察和書寫診斷報(bào)告。報(bào)告完成后經(jīng)掃描或由手術(shù)室人員取回，手術(shù)醫(yī)師便可看到結(jié)果。對于單個(gè)標(biāo)本，一般從快速冰凍室接到標(biāo)本至發(fā)出診斷報(bào)告整個(gè)流程約需30分鐘左右。如果同時(shí)接收到多份標(biāo)本或多個(gè)病例，則報(bào)告發(fā)出時(shí)間會超過30分鐘甚至更長。報(bào)告發(fā)出后，冰凍的組織(“凍對”)和剩余未取材的組織塊(“凍剩”)均進(jìn)行福爾馬林固定以備常規(guī)石蠟進(jìn)一步診斷。
術(shù)中快速冰凍病理診斷的適應(yīng)癥
1、需要確定病變的性質(zhì)，如腫瘤或非腫瘤、良性或惡性，以決定手術(shù)方案。當(dāng)病變不典型而不能確定良性、惡性病變時(shí)，病理醫(yī)師會提供考慮性或傾向性意見以供臨床參考，或待石蠟切片進(jìn)一步診斷。
2、了解惡性腫瘤的擴(kuò)散情況，如腫瘤是否浸潤相鄰組織，有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。如最常見的甲狀腺癌中“中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)”、乳腺癌的前哨淋巴結(jié)等是否轉(zhuǎn)移。
3、確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留。如頭面部惡性腫瘤手術(shù)，常常需要確定多個(gè)方向切緣有無腫瘤組織殘留。
4、確認(rèn)切除的組織，如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位組織等。如先天性巨結(jié)腸須證實(shí)手術(shù)切緣的腸壁內(nèi)是否有肌間神經(jīng)節(jié)細(xì)胞存在。
5、對術(shù)中遇到的與術(shù)前診斷不符或術(shù)前預(yù)計(jì)之外的緊急情況，希望征求病理醫(yī)師的意見之后再做下一步?jīng)Q策。
術(shù)中快速冰凍病理診斷的局限性
1、由于術(shù)中快速冰凍病理診斷過程具有時(shí)間緊迫性，并且新鮮標(biāo)本取材數(shù)量受限、冰凍過程對細(xì)胞學(xué)形態(tài)具有影響、制片過程脫水透明時(shí)間不充分致使組織細(xì)胞形態(tài)不清楚、不能進(jìn)行免疫組化等輔助檢查、報(bào)告醫(yī)師水平不一，這些因素均可導(dǎo)致部分病例術(shù)中快速冰凍病理診斷的漏診和誤診，因而術(shù)中快速冰凍切片與術(shù)后石蠟切片病理診斷存在5%的不一致率。
2、體積較大的良性腫瘤發(fā)生局灶癌變時(shí)，因冰凍取材數(shù)目受限不能全取，或切片時(shí)未切到癌變層而可能漏診。
3、交界性及良惡性不能確定的腫瘤是客觀存在的，某些情況冰凍病理檢查僅能提供一個(gè)參考性意見，或推遲至石蠟切片才能明確病變的性質(zhì)，個(gè)別病例即使石蠟切片尚需多名醫(yī)師討論甚至外出專家會診也不一定能得到確切診斷。
4、腫瘤鈣化部分、脂肪組織、含水量高的組織無法冰凍制片。
不宜行術(shù)中快速冰凍病理診斷的情況
1、位于體表術(shù)前易于常規(guī)活檢者，如乳腺癌、淺表淋巴結(jié)、皮膚色素性病變等。
2、過小標(biāo)本(標(biāo)本直徑≤0.2cm者)、骨、脂肪、皮膚、鈣化組織等。
3、疑為惡性淋巴瘤者。
4、需要依據(jù)核分裂像計(jì)數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤，如平滑肌腫瘤。
5、主要依據(jù)侵襲或轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為才能判斷為惡性的腫瘤，如甲狀腺濾泡癌。
6、已知具有傳染性的標(biāo)本，如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋病等，如有特別需要，臨床醫(yī)師應(yīng)在送檢單中注明。
上述情況一般需要石蠟切片確診。
總之，快速冰凍病理診斷時(shí)間緊、壓力大，因而不允許也沒有時(shí)間對整個(gè)病變做詳盡觀察，所以局部取材的小組織有時(shí)不一定完全代表整個(gè)病變。并且冰凍切片與術(shù)后石蠟切片組織圖像(質(zhì)量)有時(shí)相差甚遠(yuǎn)。再者，病理檢查實(shí)際是一種抽樣檢查。因此，冰凍病理診斷不一定都能做出明確診斷，有時(shí)還會存在一定的誤診率。每一項(xiàng)醫(yī)療技術(shù)都有其適用范圍和局限性，希望患者及其家屬、臨床醫(yī)生通過本文能了解術(shù)中快速冰凍切片病理診斷的基本內(nèi)容、適應(yīng)癥和局限性，并最大限度發(fā)揮其在診療中的作用。
覃業(yè)軍
醫(yī)學(xué)博士 碩士研究生導(dǎo)師
省立醫(yī)院病理科主任、主任醫(yī)師
山東省醫(yī)師協(xié)會臨床病理科醫(yī)師分會主任委員
山東省醫(yī)學(xué)會病理學(xué)分會副主任委員
山東省抗癌協(xié)會病理分會副主任委員
中國醫(yī)師協(xié)會病理科醫(yī)師分會委員
中國研究型醫(yī)院學(xué)會超微病理專業(yè)委員會委員
中國醫(yī)療器械行業(yè)協(xié)會病理專業(yè)委員會副主任委員
中國老年醫(yī)學(xué)學(xué)會病理分會常委
中國研究型醫(yī)院學(xué)會病理專業(yè)委員會委員
